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基因定点突变试剂盒
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1、基因定点突变试剂盒（Site-directed Gene Mutagenesis Kit）可以用于单点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失（deletion）或插入（insertion）。 2、本试剂盒是一个利用目前最新的基因定点突变技术设计而成的试剂盒。只需要通过基于PCR的突变质粒的合成，以及基于模板消化酶的模板质粒的消化，转化培养以及后续的酶切或测序鉴定，即可的到预期的突变质粒。 3、本试剂盒的主要技术原理：预先设计长度通常为30个碱基以上的互补的两个引物，在引物中含有预期的突变位点。然后以待突变的质粒为模板，用这两个引物进行PCR扩增反应。这样可以产生含有预期的突变位点的双链质粒，但这个双链质粒中有两个nick位点。待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌，在细菌中会被甲基化修饰，而在体外通过PCR扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶模板消化酶处理，可以消化掉待突变的质粒模板，而使通过PCR扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性的保留下来。这样把模板消化酶处理过的产物转化细菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒。 4、本试剂盒提供了超级感受态细菌细胞，可直接用于转化。 5、本试剂盒提供一套阳性对照，可检测整个体系的稳定性。
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